单环刺螠纤溶酶的重组表达及活性研究—硕士毕业论文下载

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论文目录摘要第1-7页 Abstract第7-13页 前言第13-30页 1 血栓类疾病的概述第13-18页 · 血栓类疾病的危害第13-14页 · 血栓的类型第14页 · 血栓形成的机理第14-17页 · 溶栓药物的现状第17-18页 2 天然溶栓剂第18-19页 3 体外异源表达系统第19-22页 · 大肠杆菌表达系统第20-21页 · 酵母表达系统第21-22页 4 毒性蛋白的克隆表达第22-25页 5 包涵体复性的相关研究第25-28页 · 包涵体的形成第25页 · 包涵体蛋白的复性机制第25-27页 · 包涵体的处理方法第27页 · 包涵体蛋白的复性方法第27-28页 · 小结第28页 6 立题依据与研究意义第28-30页 第一章 单环刺螠纤溶酶的重组表达第30-65页 第一节 真核表达系统的构建第30-47页 1 pINA-1317-ufeⅡ和pINA-1317-ufeⅢ表达系统的构建第30-39页 · 材料、试剂第30-32页 · 载体和菌株第30页 · 培养基配制第30-31页 · 试剂配制第31-32页 · 表达载体的构建第32-36页 · 设计引物及PCR第32-34页 · PCR产物的回收及连接转化第34-36页 · 转化到Y.lipolytica Polh感受态中第36页 · 制备Y.lipolytica Polh感受态细胞的方法第36页 · 转化第36页 · 表达产物活性的鉴定第36-37页 · 结果与讨论第37-39页 · pINA-1317-ufeⅡ和pINA-1317-ufeⅢ表达载体的构建第37-39页 · 表达活性测定第39页 2 pPICZαA-ufeⅡ表达系统的构建第39-47页 · 实验材料第39-41页 · 载体与菌株第39页 · 培养基配制第39-41页 · 试剂第41页 · 实验方法第41-45页 · 构建表达系统第41-42页 · 电转化第42-44页 · X-33-pPICZαA-ufeⅡ的诱导表达第44-45页 · 结果与讨论第45-47页 · pPICZαA-ufeⅡ的表达载体的构建第45-46页 · 酶活测定第46-47页 第二节 UFE的大肠杆菌表达系统构建第47-64页 1 pET32a-ufeⅡ重组质粒的表达第47-55页 · 实验材料第47-49页 · 载体与菌株第47页 · 试剂第47-49页 · 实验方法第49-52页 · 构建pET32a-ufeⅡ的表达系统第49-50页 · pET32a-ufeⅡ的诱导表达第50页 · 包涵体蛋白的复性和纯化第50-51页 · SDS-PAGE检测第51页 · 复性蛋白的活性检测第51-52页 · 结果与讨论第52-55页 · 构建的pET32a-ufeⅡ表达系统第52-53页 · SDS-PAGE检测第53-54页 · 活性的检测第54-55页 2 pMCSG9-ufeⅡ重组质粒的表达第55-57页 · 实验材料第55页 · 载体和菌株第55页 · 实验方法第55-56页 · 构建pMCSG9-ufeⅡ的表达系统第55页 · pMCSG9-ufeⅡ的诱导表达第55页 · 目的蛋白的纯化及活性检测第55-56页 · 结果与讨论第56-57页 · 构建pMCSG9-ufeⅡ的表达系统第56页 · 目的蛋白的纯化第56-57页 3 pET32a-ufeⅢ重组质粒的表达第57-61页 · 实验材料第57页 · 实验方法第57-59页 · 构建pET32a-ufeⅢ表达系统第57-58页 · pET32a-ufeⅢ重组质粒诱导表达第58页 · 包涵体复性和纯化第58-59页 · 结果与讨论第59-61页 · 表达条件优化第59-60页 · 包涵体复性第60-61页 4 蛋白表达条件优化实验第61-64页 · 实验方法第61-62页 · 菌株筛选第61-62页 · 自动诱导培养基第62页 · 葡萄糖浓度优化第62页 · 实验结果第62-64页 · 菌株筛选第62-63页 · 自动诱导培养基第63页 · 葡萄糖浓度优化第63-64页 讨论第64-65页 第二章 UFEⅡ体外活性研究第65-75页 · 引言第65页 · 材料和试剂第65-66页 · 主要试剂第65页 · 试剂配制第65-66页 3 方法第66-68页 · 纤维蛋白原平板实验第66-67页 · 纤维蛋白原的降解反应第67页 · 酰胺基降解实验第67-68页 · Bradford法测蛋白质浓度第68页 · 结果第68-73页 · 肽指纹图谱(PMF)进行重组蛋白鉴定第68-69页 · 纤维蛋白(原)平板实验第69-71页 · 纤维蛋白原的降解反应第71-72页 · 酰胺基降解实验第72-73页 讨论第73-75页 总结第75-77页 参考文献第77-84页 致谢第84-85页 个人简历第85页